Le principe du jeu est simple : quatre joueurs, chacun dans un déguisement à l'effigie d'un personnage de Disney, se lancent dans la traversée de courts niveaux mâtinés de plate-forme, de leviers, d'interrupteurs et de petits pièges. Si le but consiste à arriver ensemble à la sortie, Disney Universe favorise la prise de becs entre amis. Les joueurs peuvent se taper entre eux, se chopper par le col et se balancer dans le vide, ou encore attraper des transformations loufoques (en bombe, en chaussure toon ou en ballon de basket, par exemple), pour mieux se pourrir la vie. A la fin de chaque niveau, les quatre participants apparaissent sur un podium, et se voient attribuer une note sur cinq étoiles, tout en se chamaillant à l'écran pour la pure beauté du geste.